组织学绪论
六、放射自显影术
1.用途:放射自显影术旨在追踪某些物质在体内、组织或细胞中的分布与代谢路径和数量定量分析。
2.原理:将放射性同位素或放射性同位素的标记物注入动物体内或加入培养基中,间隔一定时间取材,制成标本如切片、,在暗室中于标本的上面涂以液体原子核乳胶,置暗处曝光,数日后,经显影和定影处理,再经染色后光镜观察,在放射性同位素或其标记物存在的部位,硝酸银被还原成黑色的微细颗粒;也可在电镜下观察,则称之为电镜放射自显影。由此可获知物质在机体、组织与细胞内的分布、数量及代谢路径。
七、原位杂交
1.用途:应用原位杂交术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性,可进一步从分子水平探讨细胞的基因表达及其调节机制。
2.原理:原位杂交是在研究dna复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,通过氢键结合,形成dna-dna、dna-rna或rna—rna双键分子的特点,应用带有标记的有放射性同位素,如+h、35s、32p,荧光素、生物素、地高辛等非放射性物质、dna或rna片段为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸rna或dna、片段进行杂交,然后可用放射自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mrna或dna的存在与定位。
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